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全自动生化分析仪尿碘测定方法研究

·106·

中图分类号:R591. 1

文献标识码:A

首都公共卫生2011年6月第5卷第3期Capital Journal of Public Health ,June 2011Vol. 5No. 3

文章编号:1673-7830(2011)03-0106-04

·论著·

全自动生化分析仪尿碘测定方法研究

刘玉文

【摘要】目的

杨岩康敬赵宇张春年

建立尿碘全自动生化分析仪检测方法,对方法的技术指标进行试验,与尿碘测定卫生行业标准方

按照尿碘定量检测试剂盒的技术要求,结合全自动生化分析仪的仪器特性建立与之相适应的

法进行对比评价。方法

(WS /T 68-1996)的规定对所建立的方法的灵敏度、尿碘检测方法。根据《研制生物样品监测检验方法指南》精密度、准(WS /T 107-2006)进行对比实验。并与国家卫生行业标准方法《尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法》确度进行测试,结果

标准曲线线性范围为0 400μg /L 碘;方法的检测限(灵敏度)为2. 4μg /L 碘(取样量25μl );对不同浓度的尿

样测定结果的批间变异系数为1. 5% 5. 3%(n =6);对不同浓度的尿样加标后测得回收率为94. 5% 105%(平均99. 3%);对两个尿碘国家一级标准物质测定的相对偏差均<6%(n =6);40份现场尿样的测定结果与卫生行业标准方P >0. 5)。测定40份样品需时约1. 5h (卫生行业标准方法约其差异无统计学意义(配对资料t 检验,法测定结果相比,

3. 5h );对剧毒品砷的用量为行业标准方法的5%。结论

该方法是准确的尿碘定量检测方法,其灵敏度、精密度、准确

标准曲线线性范围宽,自动化程度高,误差来源度与卫生行业标准方法一致。该方法较卫生行业标准方法操作步骤少,

省时省力,环保。但全自动生化分析仪品种多,不同仪器需研究设置不同的测定参数,专业技术要求高。开展多项目少,

检测的生化分析仪容易交叉污染,是使用此方法测定尿碘的主要误差来源。

【关键词】尿碘;全自动生化分析仪;尿碘试剂盒;检测

Determination of urine iodine by automatic biochemical analyzer

LIU Yu-wen ,YANG Yan ,KANG Jing ,ZHAO Yu ,ZHANG Chun-nian

(Heilongjiang Provincial Center for Disease Control and Prevention ,Harbin ,Heilongjiang 150030,China )

【Abstract 】Objective

To establish a method for determination of urine iodine by automatic biochemical analyzer with a A method for measuring urine iodine was established using automatic biochemistry analyzer in

urine iodine test kit and evaluate its technical specifications ,as compared to the results using the national standard method set by the Ministry of Health.Methods

accordance with both requirements of urine iodine test kit and characteristics of automatic biochemistry analyzer.In addition ,sensitivity ,precision and accuracy of the established method were evaluated according to the provisions in “Guides for Development of Monitoring and Testing Methods for Biological Samples ”set by the Ministry of Health (WS /T 68-1996),and compared with those using the national standard method of “Determination of Urine Iodine by Arsenic and Cerium Catalytic 2006)set by the Ministry of Health.Results Spectrophotometry ”(WS /T 107-With this method ,iodine levels at range of 0μg

per liter urine to 400μg per liter urine presented a linear trend in the standard curve ,with a detection limit (sensitivity )of 2. 4μg iodine per liter urine using specimen volume of 25μL.Coefficient of variation between different batches of six specimens containing different iodine concentrations varied from 1. 5percent to 5. 3percent.Recovery of the marked urine specimens with different iodine concentrations was measured as 94. 5percent to 105percent ,with an average of 99. 3percent.Relative deviations was less than six percent when determining two portions of national class A standard reference materials of urine iodine for 6times repeatedly.There was no significant difference in iodine determinations for 40portions of urine specimens collected on-site between using this method and using the national standard method (P >0. 5with paired t-test ).Determination of 40specimens cost about 1. 5hours ,as compared to about 3. 5hours by the national standard method ,while the amount of arsenic used in this method was about five percent as that used by the national standard method.Conclusion

It is a good method for quantitative

determination of urine iodine ,with sensitivity ,precision and accuracy similar to those of the national standard method set by the Ministry of Health ,as well as with fewer procedure steps ,wider linear range of standard curve ,higher level of automation ,less measurement errors ,more time-saving ,and more environment-friendly than those of the national standard method.However ,

作者单位:150030,哈尔滨,黑龙江省疾病预防控制中心

there are a lot of different kinds of biochemical analyzers with varied parameters for determinations to be set ,which required high professional technology.While biochemical analyzers used in detection of multiple projects tend to be cross-contaminated ,which is main source of errors in determination of urine iodine in this way.

【Key words 】Urine iodine ;Automatic biochemical analyzer ;Urine iodine test kit

尿碘水平是评价人群碘营养状况的重要指标

[1,2]

品监测检验方法指南》的规定,测试生化分析仪法的精密度、准确度。使用生化分析仪法和行标法灵敏度、

对比测定40份尿样,测定结果进行配对资料t 检验,比较两方法测定结果的差异。22. 1

结果测定参数

使用尿碘定量检测试剂盒在全自动

,被国内外广泛采用,碘缺乏和碘过量在当前成

为人们同等关注的公共卫生问题,尿碘检测是指导人群科学补碘的重要手段。目前,国内外公认的准确测定尿碘的方法是等离子色谱质谱联用法(ICP-MS )和砷铈催化分光光度法

[4]

[3]

,ICP-MS 法因仪器设备昂

贵,我国没有采用。砷铈催化分光光度法是我国普遍采用的尿碘测定方法,已制定为卫生行业标准(WS /T 107-2006)[5],该方法仪器设备成本低,适宜于广泛应但方法全为手工操作,步骤繁琐,测定时间长(约用,

3. 5h ),又因采用动态分光光度法测定,操作人员的行实验室的洁净度、试剂质量、消化温度、反应为负担重,

温度都严重影响测定结果,所以误差来源广泛,非训练有素的专业人员不易掌握。2010年国内有尿碘定量检测试剂盒产品

[6]

生化分析仪上进行试验,建立的双试剂6点定标,两点速率法测试方法的仪器参数见表1。

表1

测试方法测试点位监测时间测定波长

全自动生化分析仪测定尿碘的主要参数

速率法2点

加试剂R2后连续3min

405nm

反应方向曲线拟合方式样品量试剂用量

负反应(下降)logit-log4p 25μl R1:36μl ;R1:120μl

,该试剂盒除能手工操作外,还提

示可以使用全自动生化分析仪操作。现根据该试剂盒的检测原理,结合全自动生化分析仪的特性,采用双试剂多点定标,速率法分析,建立了全自动生化分析仪检测尿碘的方法,并提出了全自动生化分析仪测定尿碘的通用仪器参数。同时,按照《研制生物样品监测检(WS /T 68-1996)[7]的规定对建立的生化验方法指南》

分析仪尿碘检测方法(简称生化分析仪法)的技术指并与国家卫生行业标准方法《尿标进行测试和评价,

中碘的砷铈催化分光光度测定方法》(WS /T 107-2006)(简称行标法)进行对比,指出其适用性,具体报道如下。

测定批次

2. 22. 3

检测范围标准曲线的线性范围为碘浓度0

平行测定空白管(0管)12

400μg /L 。

灵敏度(检测限)

次,计算出均值和标准差,按检测下限由空白值的3倍标准差计算的规定,测得检测限为2. 4μg /L 碘浓度(取样量为25μl )。2. 4

精密度

选取在标准曲线范围内低、中、高3种

碘浓度尿样,分6批测定,每批平行3次,测得批间变异系数<6%(表2)。

表2

精密度实验结果(μg /L )

中浓度尿样

(n =3)

[***********]167ʃ 4

2. 4

高浓度尿样(n =3)

[***********]337ʃ 5

1. 5

低浓度尿样(n =3)

76. 570. 274. 981. 573. 878. 475. 9ʃ 45. 3

11. 1

材料与方法生化分析仪法

尿碘定量检测试剂盒(武汉众

123456x ʃ s (n =6)珋CV (%)

生生化技术有限公司提供)。日立7080全自动生化分析仪。检测方法:双试剂6点定标,两点速率法测试。1. 21. 3

行标法样品

国家卫生行业标准方法《尿中碘的砷尿样来自黑龙江省哈尔滨市五常市牛家

(WS /T 107-2006)。铈催化分光光度测定方法》

乡中心小学8 10岁学生尿样。两种浓度的尿碘标准物质来自国家碘缺乏病参照试验室。1. 4

方法技术指标测试和比对

按照《研制生物样

2. 52. 5. 1

准确度

对尿碘标准物的测定:测定2种浓度的国家尿

GBW09108h (碘含量参考值(88ʃ 9)μg /碘标准物质,

L ))和GBW09110j (碘含量参考值(208ʃ 10)μg /L )),分6批测定,每批平行3次求均值(表3)。测定值与参考值相比,其中最大相对偏差为5. 2%。

表3

测定批次

123456x ʃ s (n =6)珋

内选取低、中、高3种碘浓度尿样进行加碘标回收率实验,加碘量与尿样含碘量相当;每个加标样测定6次,每批平行3次求均值,测得回收率(Rec )(表4)。

表4

样品加碘标回收率(Rec )实验结果(n =6)

加碘标

测值

平均Rec (%)97. 899. 110199. 3

Rec (%)94. 5 10296. 8 10297. 0 10594. 5 105

对尿碘标准物的测定结果(μg /L )

GBW09108h

83. 487. 891. 989. 484. 292. 188. 1ʃ 3. 7

GBW09110j

[***********]208ʃ 4

尿样碘(μg /L )76. 2115165

平均Rec 及范围(%)

(μg /L )(μg /L )50100150

125214317

2. 5. 3尿样稀释实验:在标准曲线的测定范围内选取

低、中、高3种碘浓度尿样,分别用去离子水进行2倍和3倍稀释之后测定,按稀释倍率还原的测定结果与原尿液测定结果的相对偏差均<10%(表5)。

2. 5. 2尿样加标回收率实验:在标准曲线的测定范围

表5

尿样

原尿液(μg /L )

70. 2164335

74. 1167343

3倍稀释实验结果尿样2倍、

2倍稀释还原结果

3倍稀释还原结果

(μg /L )73. 2167345

相对偏差(%)

423

(μg /L )

低浓度尿样中浓度尿样高浓度尿样

相对偏差(%)

522

2. 6方法对比采用生化分析仪法和行标法对比测P >0. 05,表明两方法具有很好的一致性。该方检验,

法上述技术指标、行标法的技术指标术指标见表6。

[4]

定40份8 10岁儿童尿样(碘含量在56 430μg /L 之间),该方法与卫生行业标准方法比较:相关系数r =0. 994(P <0. 01),回归方程为Y 本方法=2. 9+0. 97X 行标法;两方法的平均差值为0. 56μg /L ,经配对资料t

表6

方法

生化分析仪法行标法《指南》规定

检测限(μg /L )2. 4(25μl 样)3. 0(250μl 样)<20

和《研制生物

(简称指南)规定需达到的技样品监测检验方法指南》

生化分析仪法、行标法和《指南》规定的技术指标比较

CV%1. 5 5. 32. 8 5. 5<10

Rec %94. 5 10592. 6 10790 110

线性范围(μg /L )

0 4000 250-

最大相对偏差(%)

5. 25. 0<10

3. 2

33. 1

讨论

从试验数据和技术指标比较表可知,该方法的各

因尿碘定量检测试剂盒的反应达到终点需要10

min ,许多品牌的生化分析仪不能设置长于8min 的反应时间。所以,该方法不使用终点法测试,而使用两点速率法测试,反应总时间只需5min ,能在大多数生化分析仪上使用。3. 3

从表1可知,在生化分析仪上,两点速率法的两个始末测试点设置在加入第2试剂后开始,到3min 后终止。不同速度的仪器可按此时间计算设置对应的监测点位。

项技术指标均很好地达到了《研制生物样品监测检验方法指南》规定的要求,且测定结果与行标法具有很是一个准确的定量测定尿碘的方法。此好的一致性,

外该方法省时,只需2步操作(行标法7步),且自动化;试剂用量少,特别是对剧毒品砷的用量仅为行标法的5%。

首都公共卫生2011年6月第5卷第3期Capital Journal of Public Health ,June 2011Vol. 5No. 3·109·

中图分类号:R186文献标识码:A 文章编号:1673-7830(2011)03-0109-04

·论著·

2010年北京市石景山区疑似预防接种异常反应监测

郭舫茹

【摘要】目的

吴劲李敏杨娜白云杨咸枝

分析北京市石景山区2010年疑似预防接种异常反应(Adverse Events Following Immunization ,

采用描述性方法对相关指标进行流行病学分析。结果

2010

AEFI )的发生情况,评价AEFI 监测系统运转情况。方法

年共报AEFI 48例,报告发生率19. 11/10万,涉及11种疫苗,其中麻风疫苗报告发生率最高(89. 46/10万),无细胞百白破疫苗AEFI 报告发生数居首位(20例,占41. 67%)。反应类型上一般反应占37. 50%(多为发热/红肿/硬结16/18)、异偶合症20. 83%。病例主要发生在小年龄段人群(≤2岁发生数占70. 83%)。发生时常反应41. 67%(多为皮疹18/20)、

间主要集中在5 10月份(77. 08%),多在接种后1d 内发生(89. 59%)。结论

【关键词】疑似预防接种异常反应;疫苗;监测;北京

石景山区AEFI 监测的完整性和敏感性

但仍需要加强AEFI 监测工作,规范预防接种操作,严格掌握禁忌症,减少AEFI 发生。比较高,

Surveillance of adverse events following immunization

in Shijingshan district of Beijing in 2010

GUO Fang-ru ,WU Jin ,LI Min ,YANG Na ,Bai Yun ,YANG Xian-zhi

(Shijingshan District Center for Disease Control and Prevention ,Beijing 100043,China )

【Abstract 】Objective this study.Results

To evaluate implementation of surveillance system for adverse events following immunization

Descriptive method was adopted in

(AEFI )and analyze occurrence of AEFI in Shijingshan district ,Beijing in 2010.Methods

In total ,48cases of AEFI were reported in 2010in Shijingshan ,with an incidence rate of 19. 11per

hundred thousand and involved 11kinds of vaccines ,with the highest reported incidence of AEFI with measles-rubella combined attenuated live vaccine (MR )(89. 46/100000),and highest number of cases of AEFI with diphtheria-tetanus-acellular-

作者单位:100043,北京市石景山区疾病预防控制中心

3. 4该方法是双试剂多点定标方法,表1中列出的曲

2007,23:1-2. infancy.IDD Newsletter ,

[3]Yves Gélinas ;Antoaneta Krushevska ;Ramon M.Barnes.

Determination of total iodine in nutritional and biological samples by ICP-MS following their combustion within an oxygen stream.Anal.Chem ,1998,70:1021-1025.

[4]阎玉芹,张亚平,刘列钧,等.尿中碘的过硫酸铵消

化—砷铈催化分光光度测定方法.中国地方病学杂志,2004,23(6):582-585.

[5]卫生部.尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS /T

107-2006).北京:人民卫生出版社,2006.

[6]湖北省食品药品监督管理局.尿碘定量检测试剂盒

(YZB /鄂0066-2010).2010.

[7]卫生部.研制生物样品监测检验方法指南(WS /T 68-1996).北京:中国标准出版社,1996.

(收稿日期:2011-04-20)

线拟合方式为对数模式,经此模式拟合的曲线呈现直便于观察标准点的偏移情况。标准点出现严线关系,

重偏移时,定标不能通过,仪器报警,此时先检查参数设置是否正确。若参数设置正确,多因测试杯被污染所致,应清洗。3. 5

该方法检测尿碘的范围比行标法宽,涵盖了大多数尿样的碘浓度范围。若少数样品碘浓度超出检测范围,可使用标准曲线的空白管试液将此样品稀释后重复测定,不需将样品重新进行消化处理。

27-29.

[2]WHO Tech.Consul.Iodine requirements in pregnancy and

考文献

[1]ICCIDD.Ideal iodine nutrition.IDD Newsletter ,2001,17: